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BL21(DE3)pLysS化学感受态细胞图片
产品货号:
MQ0038
中文名称:
BL21(DE3)pLysS化学感受态细胞
英文名称:
BL21(DE3)pLysS Chemically Competent Cell
产品规格:
10×100μl|50×100μl
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
BL21(DE3)pLysS感受态细胞携带pLysS质粒,具有氯霉素抗性。
pLysS含有表达T7溶菌酶的基因,T7溶菌酶可以作用于大肠杆菌细胞壁上的肽聚糖溶解大肠杆菌,能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰IPTG诱导的表达,适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。
该菌株染色体整合了λ噬菌体DE3区(DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶),BL21(DE3)pLysS感受态细胞由特殊工艺制作经pUC19质粒检测转化效率高达108cfu/μg。
保存条件:-80℃
基因型:
F-ompT hsdS(rB-mB-)gal dcm(DE3)pLysS Camr
操作说明:
1.取100μl冰上融化的L21(DE3)pLysS感受态细胞,加入目的质粒并轻轻混匀,冰上静置25分钟。
2.42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB),混匀后37℃,200rpm复苏60分钟。
4.5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含34 µg/ml氯霉素及所选质粒筛选抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
注意事项:
1.感受态细胞最好在冰上融化。
2.混入质粒时应轻柔操作。
3.转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
4.诱导时,IPTG浓度可选(0.1-2mM均可)。
5.为获得需要量的蛋白,最佳诱导时间,温度,IPTG浓度需实验者优化。
6.BL21(DE3)pLysS菌株携带pLysS质粒,除复苏培养基为无抗生素外,其余所用培养基、培养液均应含有34 µg/ml氯霉素,以防质粒丢失。
相关搜索:BL21(DE3)pLysS化学感受态细胞BL21(DE3)pLysS Chemically Competent Cell
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